TSA 免疫組織化学染色・in situ Hybridization増感システム - PerkinElmer Japan

TSA 免疫組織化学染色・in situ Hybridization増感システム

 

Increase Imaging Detection 100X with Tyramide Signal Amplification (TSA)!

Amplify Your IHC, IF or ISH Signal with TSA Reagent Solutions ...

Why Multiplex?!

Why Multiplex?

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Signal Amplification for Immunohistochemistry

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Improve the sensitivity of detection by 100-fold or more ... View Rapid Learning Presentation

Signal Amplification for In Situ Hybridization

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Get higher sensitivity with minimal change to your existing protocol ... View Rapid Learning Presentation

TSA Published Papers

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TSAシステム

存在量が少なく通常の方法ではしばしば検出することの困難なタンパク質や核酸であっても、チラミドシグナル増幅(TSA)技術によって、再現性のある検出や定量を行うことが可能となります。TSAシステムは、現在用いているイメージング装置や顕微鏡、サンプル調整方法はそのままで、免疫組織化学、免疫蛍光あるいはin situ ハイブリダイゼーションの検出を改善することができます。

 

前立腺FFPE切片のPSA検出
TSAによる増幅
抗PSA抗体(マウス)
+ HRP標識抗マウス抗体
TSA Plus Fluorescein
蛍光標識二次抗体による検出
抗PSA抗体(マウス)
+ Alexa 488標識抗マウス抗体

 

シグナル増幅の基本原理


チラミド(Tyramide) 化合物は、過酸化水素の存在下において、西洋わさびペルオキシダーゼ(HRP) の触媒作用によりラジカル化され、その近傍にある芳香属化合物と非特異的に共有結合で結びつきます。


TSAシステムではこの性質を利用し、HRP標識の抗体やプローブを用いて IHC や ISH を行った後に、ハプテン標識のチラミドを作用させます。チラミドは HRP によりラジカル化されますが、このラジカルの寿命は非常に短いため、HRPの近傍にあるサンプル組織やブロッキング剤に含まれるアミノ酸(チロシンやトリプトファン)などの芳香属化合物とのみ共有結合し、HRPの周辺にのみハプテン標識のチラミドが集積します。つまり、一つのハプテン分子を基点とし、それを拡散することなくハプテンの増幅を行うことができるのです。最後に増幅したハプテン分子を用いて、発色あるいは蛍光でシグナルを検出します。

 

TSAシステムおよびリージェントパックの構成

TSA System の各キットには、各種標識チラミドと1x アンプリフィケーション希釈液(1x Amplification Diluent)、HRP標識ストレプトアビジン、ブロッキング試薬および英文マニュアルが含まれます。リージェントパックは標識チラミドとアンプリフィケーション希釈液のみのセットになります。
パッケージサイズは、1スライドあたり100-300µLのチラミド反応液を使用した処理枚数で示されています。全ての標識チラミドは乾固されており、下表はDMSO(あるいはCyanine 3/ 5のみ精製水)で再構成後の液量を示しています。システムに含まれる1x アンプリフィケーション希釈液で50倍希釈してチラミド反応液とします。1x アンプリフィケーション希釈液(FP1052)とブロッキング試薬(FP1020)およびSA-HRP(NEL750001EA)が別途購入可能です。
この他に、必要な抗体・酵素類・発色基質など各実験系に応じて必要な試薬類は、別途準備していただく必要があります。
各種の蛍光標識チラミドを含むシステムでは、シグナル増幅をした後でそのまま蛍光を検出することができます。

Tyramide System
製品名 パッケージ 製品番号
TSA Biotin System for 200-600 slides NEL700001KT
for 50-150 slides NEL700A001KT
TSA Fluorescein System
(Ex. 494 nm, Em. 517 nm)
for 100-300 slides NEL701001KT
for 50-150 slides NEL701A001KT
TSA TMR System
(Ex. 550 nm, Em. 570 nm)
for 100-300 slides NEL702001KT
TSA Coumarin System
(Ex. 402 nm, Em. 443 nm)
for 100-300 slides NEL703001KT
TSA Cyanine 3 System
(Ex. 550 nm, Em. 570 nm)
for 50-150 slides NEL704A001KT
TSA Cyanine 5 System
(Ex. 648 nm, Em. 667 nm)
for 50-150 slides NEL705A001KT

Tyramide Reagent Pack
製品名 パッケージ 製品番号
TSA Biotin Tyramide Reagent Pack for 200-600 slides SAT700001EA
for 1,000-3,000 slides SAT700B001EA
TSA Fluorescein Tyramide Reagent Pack for 100-300 slides SAT701001EA
for 500-1,500 slides SAT701B001EA
TSA TMR Tyramide Reagent Pack for 100-300 slides SAT702001EA
TSA Cyanine 3 Tyramide Reagent Pack for 50-150 slides SAT704A001EA
for 250-750 slides SAT704B001EA
TSA Cyanine 5 Tyramide Reagent Pack for 50-150 slides SAT705A001EA

関連製品
製品名 容量 製品番号
TSA Blocking Reagent 3 g FP1020
1×Amplification diluent 60 mL FP1052
1×Plus Amplification diluent 15 mL FP1135
BCIP/NBT溶液 2x 250 mL NEL937001PK
DAB溶液 10 mL NEL938001EA

ハプテン認識抗体
製品名 容量 製品番号
Anti-DIG-HRP 0.5 mL NEF832001EA
Anti-DIG-biotin 0.5 mL NEF833001EA
Anti-Fluorescein-APL 2x 250 µ NEF709001PK
Anti-Fluorescein-HRP 2x 250 µL NEF710001EA
Anti-DNP(rat IgG1)-HRP 150 µL FP1129
Anti-DNP(rat IgG1)-AP 150 µL FP1131

After reconstitution with water


蛍光プローブ・酵素標識プローブ
製品名 容量 製品番号
Streptavidin-Fluorescein 1 mg NEL720001EA
Streptavidin-Texas Red® 1 mg NEL721001EA
Streptavidin-Coumarin 1 mg NEL722001EA
Streptavidin-HRP 2x 250 µL NEL750001EA
Streptavidin-AP 2x 250 µL NEL751001EA

標識二次抗体
製品名 標識 濃度 容量 製品番号
Anti-Human IgG (goat)* HRP 1 mg / mL 1 mL NEF802001EA
Anti-Human IgG (goat) Biotin 凍結乾燥品 0.5 mg NEF803001EA
Anti-Rabbit IgG (goat) AP 1 mg / mL 1 mL NEF814001EA
Anti-Rabbit IgG (goat) HRP 1 mg / mL 1 mL NEF812001EA
Anti-Rabbit IgG (goat) Biotin 凍結乾燥品 0.5 mg NEF813001EA
Anti-Mouse IgG (goat) AP 1 mg / mL 1 mL NEF824001EA
Anti-Mouse IgG (goat) HRP 1 mg / mL 1 mL NEF822001EA
Anti-Mouse IgG (goat) Biotin 凍結乾燥品 0.5 mg NEF823001EA

ハプテン標識ヌクレオチド